Fluorestsents-in situ hübridisatsioon. Fluorestsentsi in situ hübridisatsioon (FISH) Kalade meetod tänapäevase molekulaarse tsütogeneetika jaoks
In situ fluorestsentsi hübridiseerimise meetod (FISF - fluorescence in situ hübridiseerimine) hõlmab unikaalsete DNA nukleotiidijärjestuste kasutamist sondina, et otsida patsiendilt saadud materjalist soovitud DNA järjestusi. Lokuspetsiifiline või geenispetsiifiline DNA sond on märgistatud spetsiifilise markeriga (näiteks fluorokroom), mis võimaldab seda tuvastada fluorestsentsmikroskoopia abil. Uuritav DNA on kromosoomide ettevalmistamine mikroskoopiliseks uurimiseks, mis sisaldab metafaasi tuumas keermeid faasidevahelises faasis (mittejagunevas olekus). DNA sond ja uuritav DNA denatureeritakse, mille tulemuseks on üheahelaline DNA. DNA-sond lisatakse kromosoomipreparaadile ja inkubeeritakse DNA-sondi ja patsiendi komplementaarsete DNA-järjestuste hübridiseerimiseks piisava aja jooksul, kui patsiendil on DNA-sondiga komplementaarne DNA-piirkond. Hübridisatsioon toimub ainult komplementaarsetes DNA piirkondades ja ei puuduta fragmente teiste genoomi teistest osadest pärinevate DNA järjestustega. Fluorokroomiga märgistatud sondi olemasolu või puudumine DNA-s pärast hübridisatsiooni määratakse kromosoomide uurimisega, kasutades fluorestsentsmikroskoopiat. Tulemuses pole tavaliselt kahtlust (joonis 28.1).
FISH-i eeliste hulka kuulub suure hulga rakkude kiire analüüs, kõrge tundlikkus ja spetsiifilisus ning võime uurida kasvatamata ja mittejagunevaid rakke. Selle meetodi abil saate uurida parafiini sektsioonides olevaid rakke. Selle meetodi puudused seisnevad võimatuses saada teavet uuritud DNA või kromosoomi osa füüsikalise oleku kohta. FISH nõuab teadmisi kromosomaalse aberratsiooniga seotud lookusest, samuti tuleb valida sobiv DNA sond, mis seda aberratsiooni tuvastada suudaks. Kala FISH ei kasutata sõelumismeetodina. Meetodit kasutatakse vastuse saamiseks konkreetsele küsimusele (eeldatava spetsiifilise mutatsiooni puudumise või olemasolu kindlakstegemiseks). Reeglina täiendab see kromosoomide värvimise klassikalisi meetodeid ja on ka peamine meetod metafaasis või faasidevahelises faasis kromosoomide ja teatud haiguse (fenotüübi) aluseks olevate spetsiifiliste DNA nukleotiidijärjestuste tuvastamiseks.
FISHi kasutatakse prenataalses diagnoosimisel ja kasvaja iseloomustamiseks; pediaatrilises praktikas kasutatakse seda reeglina spetsiifiliste väärarengutega seotud submikroskoopiliste deletsioonide tuvastamiseks. Mikrodeletsioonidel põhinevaid sündroome peeti varem tundmatu etioloogiaga haigusteks, kuna kromosomaalseid deletsioone ja ümberkorraldusi, mis põhjustavad nende haiguste arengut, ei visualiseerita tavaliselt kromosomaalse analüüsi traditsiooniliste meetoditega. Selliseid väikeseid deletsioone kromosoomide konkreetsetes piirkondades saab FISH-meetodi abil suure täpsusega tuvastada. Submikroskoopilistest deletsioonidest põhjustatud haiguste hulka kuuluvad
FISH-tehnika - fluorestsents-in situ hübridisatsioon töötati välja 1980-ndate keskel ja seda kasutatakse kromosoomides spetsiifiliste DNA-järjestuste olemasolu või puudumise tuvastamiseks, samuti 6. kromosoomi tsentromeeril paikneva alfa-satelliidi DNA, CEP6 (6p11.1-q11) tuvastamiseks. 1).
See andis olulise muutuse tuumori antigeenide tuvastamisega seotud melanotsüütilise geneesi onkoloogiliste haiguste diagnoosimisel. Pahaloomulise taustal määratakse mutatsioon kolmes antigeenis: CDK2NA (9p21), CDK4 (12q14) ja CMM1 (1p). Sellega seoses on melanoomi ja selle prekursorite varajases diagnoosimisel suur tähtsus objektiivse diferentsiaaldiagnostika võimalusel, mis põhineb melanotsüütiliste nahakasvajate geneetiliste omaduste kindlakstegemisel. Normaalse uuritud geenide komplektiga ja 6. kromosoomi tuumas on kaks punasega värvitud RREB1 geeni, kaks MYB geeni kollane värvus, kaks CCND1 geeni on roheliselt esiletõstetud ja kromosoomi 6 kaks tsentromeeri sinised. Diagnostilistel eesmärkidel kasutatakse fluorestsentsproove.
Reaktsioonitulemuste hindamine: loendatakse iga proovi 30 tuumas punaste, kollaste, roheliste ja siniste signaalide arv, geneetiliste häirete erinevate variantide neli parameetrit, milles proov vastab geneetiliselt melanoomile. Näiteks vastab proov melanoomile, kui CCND1 geeni keskmine arv tuuma kohta on ≥ 2,5. Sama põhimõtet kasutatakse ka teiste geenide koopiate arvu hindamiseks. Ravimit peetakse FISH-positiivseks, kui vähemalt üks neljast tingimusest on täidetud. Proove, milles kõik neli parameetrit on piirväärtusest madalamad, loetakse FISH negatiivseks.
Spetsiifiliste DNA järjestuste määramine kromosoomides viiakse läbi biopsiate või kirurgilise materjali lõikudel. Praktikas näeb FISH-reaktsioon välja selline: melanotsüütide tuumades DNA-d sisaldavat testmaterjali töödeldakse selle molekuli osaliseks hävitamiseks, et murda kaheahelaline struktuur ja hõlbustada seeläbi juurdepääsu soovitud geenipiirkonnale. Proovid klassifitseeritakse vastavalt DNA molekuli külge kinnitumise kohale. FISH-reaktsiooni materjaliks kliinilises praktikas on parafiinkoelõigud, määrded ja väljatrükid.
FISH-reaktsioon võimaldab teil leida muudatusi, mis on toimunud DNA molekulis geeni koopiate arvu suurenemise, geeni kaotuse, kromosoomide arvu muutuse ja kvalitatiivsete muutuste tagajärjel - geenide lookuste liikumine nii ühes ja samas kromosoomis kui ka kahe kromosoomi vahel.
Spearmani korrelatsioonikordajat kasutatakse FISH-reaktsiooni abil saadud andmete töötlemiseks ja kolme uurimisrühma geenide koopiate arvu vahelise suhte uurimiseks.
Melanoomi iseloomustab koopiate arvu suurenemine nevu ja düsplastilise nevuga võrreldes.
Lihtsal nevusel, võrreldes düsplastilise nevuga, on vähem koopiaarvu kõrvalekaldeid (st normaalsemad koopianumbrid).
Otsustuspuud kasutatakse otsustusreeglite konstrueerimiseks, et ennustada, kas valim kuulub teatud klassi (lihtsa ja düsplastilise nevi diferentsiaaldiagnostika). See lähenemisviis on ennast praktikas hästi tõestanud ja selle meetodi rakendamise tulemusi (erinevalt paljudest teistest meetoditest, näiteks närvivõrgustikest) saab selgelt tõlgendada otsustusreeglite konstrueerimiseks lihtsa, düsplastilise nevi ja melanoomi eristamiseks. Algandmed olid kõigil juhtudel nelja geeni koopiate arv.
Diferentsiaaldiagnostika otsustamise reegli konstrueerimise probleem on jagatud mitmeks etapiks. Esimeses etapis eristatakse melanoom ja nevus, arvestamata nevusitüüpi. Järgmises etapis luuakse otsustusreegel lihtsa ja düsplastilise nevi eraldamiseks. Lõpuks on viimases etapis võimalik ehitada "otsustuspuu", et määrata düsplastilise nevuse düsplaasia aste.
Nevi alamülesanneteks klassifitseerimise probleemi selline jaotus võimaldab igal etapil saavutada suure ennustamistäpsuse. Sisestusandmed "otsustuspuu" konstrueerimiseks on andmed nelja geeni koopiaarvu kohta patsientide puhul, kellel on diagnoos "melanoom" ja patsientide kohta, kellel on diagnoos "mitte melanoom" (erinevat tüüpi nevusiga patsiendid - lihtsad ja düsplastilised). Iga patsiendi kohta on andmed 30 raku geenikoopia arvu kohta.
Seega võimaldab diagnoosi ennustamise probleemi jagamine mitmeks etapiks luua ülitäpse otsuse reeglid mitte ainult melanoomi ja nevi eristamiseks, vaid ka nevuse tüübi määramiseks ja düsplastilise nevuse düsplaasia astme ennustamiseks. Konstrueeritud "otsustuspuud" on visuaalne viis diagnoosi ennustamiseks geenikoopiate andmete põhjal ja neid saab kliinilises praktikas hõlpsasti eristada healoomuliste, pahaloomuliste ja pahaloomuliste melanotsüütiliste naha kasvajate eristamisel. Kavandatud täiendav diferentsiaaldiagnostika meetod on eriti oluline hiiglasliku kaasasündinud pigmenteerunud nevi ja düsplastilise nevi ekstsisioonil lastel, kuna selliste patsientide pöördumisel meditsiiniasutustesse täheldatakse diagnostiliste vigade suurt protsenti. Kirjeldatud meetodi kasutamise tulemused on väga tõhusad, seda on soovitatav kasutada pigmenteerunud nahakasvajate diagnoosimisel, eriti FAMM-sündroomiga patsientidel.
Juht
"Onkogeneetika"
Zhusina
Julia Gennadevna
Lõpetanud Voroneži Riikliku Meditsiiniülikooli pediaatriteaduskonna, mis sai nime V.I. N.N. Burdenko 2014. aastal.
2015 - internatuur teraapias V.G. N.N. Burdenko.
2015 - diplomikursus erialal "Hematoloogia" Moskvas Hematoloogiliste Uuringute Keskuses.
2015-2016 - arst-terapeut, VGKBSMP №1.
2016 - kinnitati arstiteaduste kandidaadi kraadi väitekirja teema "haiguse kliinilise käigu ja prognoosi uuring aneemilise sündroomiga kroonilise obstruktiivse kopsuhaigusega patsientidel". Üle 10 publikatsiooni kaasautor. Geneetikat ja onkoloogiat käsitlevatel teaduslikel ja praktilistel konverentsidel osaleja.
2017 - edasijõudnute koolituskursus teemal: "Pärilike haigustega patsientide geeniuuringute tulemuste tõlgendamine".
Alates 2017. aastast residentuur erialal "Geneetika" RMANPO baasil.
Juht
"Geneetika"
Kanivets
Ilja Vjatšeslavovitš
Kanivets Ilja Vjatšeslavovitš, geneetik, arstiteaduste kandidaat, geenimeditsiini geenikeskuse geneetikaosakonna juhataja. Täienduskoolituse alal Vene Meditsiiniakadeemia meditsiinigeneetika osakonna assistent.
Ta on lõpetanud Moskva Riikliku Meditsiini- ja Stomatoloogiaülikooli arstiteaduskonna 2009. aastal ning 2011. aastal residentuuri sama ülikooli meditsiinigeneetika osakonnas erialal "Geneetika". 2017. aastal kaitses ta arstiteaduste kandidaadi kraadi saamiseks lõputöö teemal: DNA piirkondade (CNV) koopiate arvu variatsioonide molekulaarne diagnoosimine kaasasündinud väärarengute, fenotüübi kõrvalekallete ja / või vaimse alaarenguga lastel suure tihedusega oligonukleotiidide mikrokihtide SNP-de kasutamisel "
Aastatel 2011-2017 töötas ta laste kliinilises haiglas geneetikuna. N.F. Filatov, föderaalse riigieelarveliste teadusasutuste teadusliku nõuande osakond "Meditsiinigeneetiliste uuringute keskus". Alates 2014. aastast kuni tänaseni on ta olnud MGC Genomedi geneetikaosakonna juhataja.
Peamised tegevusalad: pärilike haiguste ja kaasasündinud väärarengutega patsientide diagnostika ja ravi, epilepsia, päriliku patoloogia või arenguhäiretega perede meditsiiniline ja geneetiline nõustamine, sünnieelne diagnostika. Konsultatsiooni käigus analüüsitakse kliinilisi andmeid ja genealoogiat, et teha kindlaks kliiniline hüpotees ja vajalik kogus geneetilisi uuringuid. Uuringu tulemuste põhjal tõlgendatakse andmeid ja selgitatakse konsultantidele saadud teavet.
Ta on üks projekti Geneetics School asutajatest. Regulaarselt räägib konverentsidel. Loenguid peavad nii arstid, geneetikud, neuroloogid kui ka sünnitusarstid-günekoloogid, samuti pärilike haigustega patsientide vanemad. Ta on üle 20 kirjutise ja kaasautor Venemaa ja välismaa ajakirjades.
Ametialaste huvide valdkond on kaasaegsete genoomi hõlmavate uuringute juurutamine kliinilisse praktikasse, nende tulemuste tõlgendamine.
Vastuvõtuaeg: ke, reede 16-19
Juht
"Neuroloogia"
Šarkov
Artem Aleksejevitš
Sharkov Artjom Aleksejevitš - neuroloog, epileptoloog
2012. aastal õppis ta Lõuna-Koreas Daegu Haanu ülikoolis rahvusvahelise programmi "Oriental Medicine" raames.
Alates 2012. aastast - osalemine geenitestide tõlgendamise andmebaasi ja algoritmi xGenCloud korraldamisel (https://www.xgencloud.com/, projektijuht - Igor Ugarov)
Lõpetanud N.I.-i nimelise Vene Riikliku Uurimismeditsiini Ülikooli lasteteaduskonna. Pirogov.
Aastatel 2013–2015 õppis ta neuroloogia kliinilises residentuuris neuroloogia teaduskeskuses.
Alates 2015. aastast töötab ta neuroloogi, teaduse assistendina akadeemikus Yu.E. Veltischev GBOU VPO RNIMU neid. N.I. Pirogov. Samuti töötab ta V-nimelise kliiniku “Epileptoloogia ja neuroloogia keskus” video-EEG monitooringu labori neuroloogi ja arstina. AA Kazaryan "ja" Epilepsiakeskus ".
Aastal 2015 õppis ta Itaalias uimastiresistentsete epilepsia rahvusvahelisel elamukursusel, ILAE, 2015.
2015. aastal täiendõpe - "Kliiniline ja molekulaargeneetika praktiseerivatele arstidele", RCCH, RUSNANO.
2016. aastal täiendõpe - "Molekulaargeneetika alused" bioinformaatika doktorikraadi juhendamisel. Konovalova F.A.
Alates 2016. aastast - Genomedi labori neuroloogilise osakonna juhataja.
2016. aastal õppis ta Itaalias San Servolo rahvusvahelisel edasijõudnute kursusel: Brain Exploration and Epilepsy Surger, ILAE, 2016 koolis.
2016. aastal täiendkoolitus - "Uudsed arstide geneetilised tehnoloogiad", "Laborimeditsiini instituut".
Aastal 2017 - kool "NGS meditsiinigeneetikas 2017", Moskva Riiklik Teaduskeskus
Praegu viib ta MD juhataja professor juhendamisel läbi teaduslikke uuringuid epilepsiageneetika valdkonnas. Belousova E.D. ja professor, d.m.s. Dadali E.L.
Kiideti heaks arstiteaduste kandidaadi kraadi väitekirja teema "Varase epilepsia entsefalopaatia monogeensete variantide kliinilised ja geneetilised omadused".
Peamised tegevusalad on epilepsia diagnoosimine ja ravi lastel ja täiskasvanutel. Kitsas spetsialiseerumine - epilepsia, epilepsia geneetika kirurgiline ravi. Neurogeneetika.
Teaduslikud publikatsioonid
Sharkov A., Sharkova I., Golovteev A., Ugarov I. "Diferentsiaaldiagnostika optimeerimine ja geneetilise testimise tulemuste tõlgendamine XGenCloudi ekspertsüsteemi poolt mõnes epilepsia vormis". Meditsiinigeneetika, nr 4, 2015, lk. 41.
*
Sharkov A.A., Vorobiev A.N., Troitsky A.A., Savkina I.S., Dorofeeva M.Yu., Melikyan A.G., Golovteev A.L. "Multifokaalsete ajukahjustuste epilepsia operatsioon tuberoskleroosiga lastel." XIV Vene kongressi "INNOVATIIVSED TEHNOLOOGIAD PEDIATRIKA JA PEDIATRIAKIRURGIA" kokkuvõtted. Vene perinatoloogia ja pediaatria bülletään, 4, 2015. - lk 226-227.
*
Dadali E.L., Belousova E.D., Sharkov A.A. "Molekulaarsed geneetilised lähenemisviisid monogeense idiopaatilise ja sümptomaatilise epilepsia diagnoosimiseks". XIV Vene kongressi lõputöö "INNOVATIIVSED TEHNOLOOGIAD PEDIATRIKA JA PEDIATRILISES KIRURGIOONIS". Vene perinatoloogia ja pediaatria bülletään, 4, 2015. - lk 221.
*
Sharkov A.A., Dadali E.L., Sharkova I.V. "Meeste patsientide CDKL5 geeni mutatsioonidest põhjustatud varajase II tüüpi epilepsia entsefalopaatia harv variant." Konverents "Epileptoloogia neuroteaduste süsteemis". Konverentsimaterjalide kogu: / Toimetanud: prof. Neznanova N.G., prof. Mihhailova V.A. SPb .: 2015. - Lk. 210–212.
*
Dadali E. L., Sharkov A. A., Kanivets I. V., Gundorova P., Fominykh V. V., Sharkova I, V ,. Troitsky A.A., Golovteev A.L., Polyakov A.V. KCTD7 geeni mutatsioonidest põhjustatud 3. tüüpi müokloonilise epilepsia uus alleelne variant // Meditsiinigeneetika. -2015.- v.14.-№9.- lk.44-47
*
Dadali E. L., Sharkova I. V., Sharkov A. A., Akimova I. A. "Päriliku epilepsia diagnoosimise kliinilised ja geneetilised tunnused ning kaasaegsed meetodid." Materjalide kogu "Molekulaarbioloogilised tehnoloogiad meditsiinipraktikas" / Toim. Korrespondentliige RAYEN A.B. Maslennikov - väljaanne. 24.- Novosibirsk: Akademizdat, 2016.- 262: lk. 52-63
*
Belousova E.D., Dorofeeva M.Yu., Sharkov A.A. Epilepsia mugulises skleroosis. Filmis "Ajuhaigused, meditsiinilised ja sotsiaalsed aspektid", toimetaja Gusev EI, Gekht AB, Moskva; 2016; lk 391-399
*
Dadali E. L., Sharkov A. A., Sharkova I. V., Kanivets I. V., Konovalov F. A., Akimova I. A. Pärilikud haigused ja sündroomid, millega kaasnevad palavikulised krambid: kliinilised ja geneetilised omadused ning diagnostilised meetodid. // Vene ajakiri laste neuroloogiast .- T. 11.- №2, lk. 33-41.doi: 10.17650 / 2073-8803- 2016-11- 2-33-41
*
Sharkov A. A., Konovalov F. A., Sharkova I. V., Belousova E. D., Dadali E. L. Molekulaarsed geneetilised lähenemisviisid epileptilise entsefalopaatia diagnoosimiseks. Abstraktsioonide kogumik "VI BALTI KONGRESS LASTE NEUROLOGIAS" / Toimetanud professor Guzeva V.I. Peterburi, 2016, lk. 391
*
Kahepoolse ajukahjustusega laste farmatseutilise vastupidava epilepsia hemisfotoomia Zubkova NS, Altunina G.Ye., Zemlyansky M.Y., Troitsky A.A., Sharkov A.A., Golovteev A.L. Abstraktsioonide kogumik "VI BALTI KONGRESS LASTE NEUROLOGIAS" / Toimetanud professor Guzeva V.I. Peterburi, 2016, lk. 157.
*
*
Artikkel: Varase epileptilise entsefalopaatia geneetika ja erinev ravi. A.A. Šarkov *, I.V. Sharkova, E. D. Belousova, E.L. Dadali. Ajakiri Neurology and Psychiatry, 9, 2016; Probleem 2doi: 10.17116 / jnevro 20161169267-73
*
Golovteev A.L., Sharkov A.A., Troitsky A.A., Altunina G.E., Zemlyansky M.Y., Kopachev D.N., Dorofeeva M.Yu. "Epilepsia kirurgiline ravi mugulises skleroosis", toimetaja M. Dorofeeva, Moskva; 2017; lk 274
*
Rahvusvahelise epilepsiavastase liiga epilepsia ja epilepsiahoogude uued rahvusvahelised klassifikatsioonid. Ajakiri Neurology and Psychiatry. C.C. Korsakov. 2017.Vool 117.No 7.PP 99-106
Juht
"Sünnieelne diagnostika"
Kievskaja
Yulia Kirillovna
2011. aastal lõpetas ta Moskva Riikliku Meditsiini- ja Stomatoloogiaülikooli. A.I. Evdokimova üldmeditsiini kraadiga. Ta õppis residentuuris sama ülikooli meditsiinigeneetika osakonnas geneetika erialal.
Aastal 2015 lõpetas ta sünnitusabi ja günekoloogia eriala FSBEI HPE "MGUPP" arstide täiendõppe meditsiiniinstituudis
Alates 2013. aastast viib ta läbi konsultatiivset vastuvõttu riigieelarvelises tervishoiuasutuses "Pereplaneerimise ja paljundamise keskus" DZM
Alates 2017. aastast on ta olnud Genomedi labori sünnituseelse diagnostika osakonna juhataja
Ta annab regulaarselt ettekandeid konverentsidel ja seminaridel. Loenguid erinevate erialade arstidele reproduktsiooni ja sünnieelse diagnostika alal
Viib läbi sünnieelse diagnostika alal rasedate naiste meditsiinilisi ja geneetilisi nõuandeid, et vältida kaasasündinud väärarengutega laste sündi, samuti perekondade puhul, kellel on eeldatavasti pärilik või kaasasündinud patoloogia. Tõlgendab DNA diagnostika tulemusi.
Spetsialistid
Latõpov
Arthur Šamilevitš
Latõpov Artur Šamilevitš - kõrgeima kvalifikatsioonikategooria arstigeneetik.
Pärast 1976. aastal Kaasani Riikliku Meditsiiniinstituudi arstiteaduskonna lõpetamist töötas ta mitu aastat esmalt arstina geneetilise geneetika kabinetis, seejärel Tatarstani Vabariikliku Haigla meditsiinigenetiliste keskuste juhatajana, Tatarstani Vabariigi tervishoiuministeeriumi peaspetsialistina, Kaasani Meditsiiniülikooli osakondade õpetajana.
Üle 20 reproduktiiv- ja biokeemilise geneetika probleemiga seotud teadustöö autor, osalenud paljudel riiklikel ja rahvusvahelistel meditsiinigeneetika probleeme käsitlevatel kongressidel ja konverentsidel. Tutvustas keskuse praktilises töös rasedate ja vastsündinute massilise sõeluuringu meetodeid pärilike haiguste osas, viis läbi tuhandeid invasiivseid protseduure loote kahtlustatud pärilike haiguste esinemiseks raseduse erinevatel etappidel.
Alates 2012. aastast töötab ta meditsiinilise geneetika osakonnas sünnieelse diagnostika kursusel Venemaa kraadiõppe akadeemias.
Teadusuuringute huvid - metaboolsed haigused lastel, sünnieelne diagnostika.
Vastuvõtuaeg: ke 12-15, la 10-14Arstide vastuvõtt toimub kokkuleppel.
Geneetik
Gabelko
Denis Igorevitš
2009. aastal lõpetas ta KSMU nimelise arstiteaduskonna S. V. Kurashova (eriala "Üldine meditsiin").
Praktika tervishoiu ja sotsiaalse arengu föderaalse agentuuri kraadiõppe Peterburi meditsiiniakadeemias (eriala "Geneetika").
Praktika teraapias. Esmane ümberõpe erialal "Ultraheli diagnostika". Alates 2016. aastast on ta Fundamentaalmeditsiini ja Bioloogia Instituudi kliinilise meditsiini põhialuste osakonna töötaja.
Ametialaste huvide valdkond: sünnieelne diagnostika, kaasaegsete sõeluuringute ja diagnostikameetodite kasutamine loote geneetilise patoloogia tuvastamiseks. Pärilike haiguste kordumise riski määramine perekonnas.
Geneetikat, sünnitusabi ja günekoloogiat käsitlevatel teaduslikel ja praktilistel konverentsidel osaleja.
Töökogemus 5 aastat.
Konsultatsioon kokkuleppelArstide vastuvõtt toimub kokkuleppel.
Geneetik
Grishina
Kristina Alexandrovna
Lõpetanud 2015. aastal Moskva Riikliku Meditsiini- ja Stomatoloogiaülikooli üldmeditsiini erialal. Samal aastal astus ta residentuuri erialal 30.08.30 "Geneetika" föderaalses riigieelarves asuvas teadusasutuses "Meditsiinigeneetiliste uuringute keskus".
Ta asus tööle raskete pärilike haiguste molekulaargeneetika laboris (juhataja, bioloogiateaduste doktor A. V. Karpukhin) märtsis 2015 teaduslabori assistendina. Alates 2015. aasta septembrist on ta üle viidud teaduri ametikohale. Ta on rohkem kui 10 artikli autor ja kaasautor kliinilistes geneetikates, onkogeneetikas ja molekulaarses onkoloogias nii Venemaa kui ka välismaa ajakirjades. Meditsiinigeneetika konverentside regulaarne osaleja.
Teaduslike ja praktiliste huvide valdkond: päriliku sündroomse ja multifaktoriaalse patoloogiaga patsientide meditsiiniline ja geneetiline nõustamine.
Geneetiku konsultatsioon võimaldab teil vastata küsimustele:
kas lapse sümptomid on päriliku häire tunnused
milliseid uuringuid on vaja põhjuse väljaselgitamiseks
täpse prognoosi määramine
soovitused sünnieelse diagnoosimise läbiviimiseks ja tulemuste hindamiseks
kõik, mida peate teadma pere planeerimisel
iVF planeerimise konsultatsioon
kohapealsed ja veebipõhised konsultatsioonid
ta võttis osa teadus- ja praktilisest koolist "Uuenduslikud geneetilised tehnoloogiad arstidele: rakendamine kliinilises praktikas", Euroopa Inimgeneetika Ühingu (ESHG) konverentsil ja muudel inimgeneetikat käsitlevatel konverentsidel.
Viib läbi eeldatavate pärilike või kaasasündinud patoloogiatega perekondade meditsiinilisi ja geneetilisi nõustamisviise, sealhulgas monogeenseid haigusi ja kromosomaalseid kõrvalekaldeid, määrab laboratoorsete geeniuuringute näidustused ja tõlgendab DNA-diagnostika tulemusi. Konsulteerib rasedaid sünnieelse diagnostika küsimustes, et vältida kaasasündinud väärarengutega laste sündi.
Geneetik, sünnitusarst-günekoloog, arstiteaduste kandidaat
Kudryavtseva
Jelena Vladimirovna
Geneetik, sünnitusarst-günekoloog, arstiteaduste kandidaat.
Spetsialist reproduktiivnõustamise ja päriliku patoloogia alal.
Lõpetanud Uurali Riikliku Meditsiiniakadeemia 2005. aastal.
Residentuur erialal "Sünnitusabi ja günekoloogia"
Praktika geneetikas
Professionaalne ümberõpe erialal "Ultraheli diagnostika"
Tegevused:
- Viljatus ja raseduse katkemine Vasilisa Yurievna
Ta on lõpetanud Nižni Novgorodi Riikliku Akadeemia arstiteaduskonna (eriala "Üldmeditsiin"). Ta lõpetas Moskva Riikliku Geneetika Teaduskeskuse kliinilise residentuuri. 2014. aastal lõpetas ta praktika emadele ja lastele mõeldud kliinikus (IRCCS materno infantiilne Burlo Garofolo, Trieste, Itaalia).
Alates 2016. aastast töötab ta Genomed LLC-s konsultatsiooniarstina.
Ta osaleb regulaarselt geneetikaga seotud teaduslikel ja praktilistel konverentsidel.
Peamised tegevusalad: geneetiliste haiguste kliinilise ja laboratoorse diagnostika ning tulemuste tõlgendamise nõustamine. Eeldatavasti päriliku patoloogiaga patsientide ja nende perekondade ravi. Nõustamine raseduse planeerimisel, samuti raseduse ajal sünnieelse diagnoosi osas, et vältida kaasasündinud patoloogiaga laste sündi.
HER-2 kasvaja staatuse määramine FISH abil - kasvaja eelsoodumuse uurimine ja õigeaegse piisava ravi valimine rinnavähi (BC) või maovähi (GC) raviks.
HER-2 (HER-2 / neu) - inimese epidermise kasvufaktori retseptor-2 on valk, mis võib mõjutada vähirakkude kasvu. Selle loob spetsiaalne geen, mida nimetatakse geeniks HER-2 / neu. HER-2 on spetsiifilise kasvufaktori, mida nimetatakse inimese epidermaalseks kasvufaktoriks, retseptor, mis esineb inimestel looduslikult. Kui inimese epidermaalne kasvufaktor kinnitub HER-2 retseptoritele rinnavähirakkudes, võib see stimuleerida nende rakkude kasvu ja jagunemist. Terves koes edastab HER-2 signaale, mis reguleerivad rakkude paljunemist ja ellujäämist, kuid HER-2 üleekspressioon võib põhjustada rakkude pahaloomulist muundamist.
HER-2 üleekspressioon mõnes rinnavähi alatüübis põhjustab suurenenud proliferatsiooni ja angiogeneesi, apoptoosi reguleerimise halvenemist (geneetiliselt programmeeritud rakkude enesehävitamine). On tõestatud, et selle retseptori üleekspressioon kasvajakoes rinnavähi korral on seotud haiguse agressiivsema käiguga, kasvaja suurenenud metastaatilise potentsiaaliga ja ebasoodsama prognoosiga. HER-2 üleekspressiooni ja rinnavähi halva prognoosi vahelise seose avastamine viis selliste raviviiside otsimiseni, mis on suunatud HER-2 / neu onkogeeni spetsiifilisele blokeerimisele (sihipärane anti-HER2-ravi).
Rinnavähk (BC) - rinnanäärme näärmekoe pahaloomuline kasvaja. RSM on naiste pahaloomuliste haiguste hulgas esikohal.
Sõltuvalt kasvaja bioloogiliste markerite olemasolust - hormonaalsete retseptorite (östrogeeni ja / või progesterooni) ekspressioon - eraldatakse HER-2 ekspressioon - hormooni-retseptori-positiivne, HER-2-positiivne ja kolmekordselt negatiivne rinnavähk.
HER-2 / neu-positiivseid (HER-2 +) rinnavähi tüüpe iseloomustab HER-2 / neu valgu kõrge ekspressioon.
HER \u003d 2 / neu-negatiivsetel (HER-2-) tüüpi rinnavähi tüüpidel on HER-2 / neu valgu ekspressioon madal või puudub üldse.
Arvatakse, et igal viiest rinnavähiga naisest on HER-2 positiivne kasvaja. Enamik rinnavähkidest sõltub hormoonidest: östrogeenidel ja progesteroonil on neid stimuleeriv toime (proliferatiivne ja neoplastiline). HER-2 positiivse rinnavähi korral on kasvajarakkude pinnal üle HER-2 retseptorite. Seda nähtust nimetatakse "positiivseks HER-2 staatuseks" ja seda diagnoositakse 15–20% -l rinnavähiga naistest.
HER-2 - inimese epidermise kasvufaktori retseptor 2, mis esineb kudedes ja normaalsetes tingimustes, osaledes rakkude jagunemise ja diferentseerumise reguleerimises. Selle ülejääk tuumorirakkude pinnal (üleekspressioon) eeldab neoplasmi kiiret kontrollimatut kasvu, metastaaside suurt riski ja teatud tüüpi ravi madalat efektiivsust. HER-2-positiivne rinnavähk on selle haiguse eriti agressiivne vorm, seetõttu on HER-2 staatuse täpne määramine ravistrateegia valimisel võtmetähtsusega.
Maovähk (GC) - mao limaskesta epiteelist pärit pahaloomuline kasvaja.
RZ on maailmas onkoloogilise haigestumuse struktuuris 4. kohal ja vähisuremuse struktuuris 2. kohal. Maovähi esinemissagedus meestel on 2 korda suurem kui naistel. Venemaa kuulub piirkondadesse, kus on kõrge maovähi esinemissagedus ja suremus sellest haigusest. Maovähi diagnoosimine varases staadiumis on haiguse pika asümptomaatilise käigu tõttu keeruline. Sageli tuvastatakse maovähk hilisemates staadiumides, kui 5-aastane elulemus ei ületa 5-10% ja keemiaravi jääb ainsaks ravimeetodiks.
Peamine maovähi ravimeetod on kirurgiline. Kuid enamikul patsientidest määratakse diagnoosimise ajal laialt levinud tuumoriprotsess, mis muudab radikaalse operatsiooni tegemise võimatuks ja nõuab süsteemset ravimiteraapiat. Keemiaravi suurendab statistiliselt oluliselt metastaatilise maovähiga patsientide üldist elulemust, parandades nende elukvaliteeti.
HER-2 onkogeen (erbB-2) tuvastati algselt rinnakasvajate korral. Selle geeni amplifikatsioon ja üleekspressioon on suhteliselt spetsiifiline sündmus rinnakartsinoomide korral ja praktiliselt ei esine muude lokaliseerumiste tuumorites. Maovähk näib olevat üks väheseid erandeid: HER-2 aktiveerimist täheldatakse umbes 10–15% -l selle organi pahaloomulistest kasvajatest ja see korreleerub haiguse agressiivse käiguga.
HER-2 üleekspressioon on halva prognoosi tegur. Erinevate uuringute kohaselt korreleerub maovähiga patsientide HER-2 geeni amplifikatsioon madala üldise elulemusega.
HER-2 seisundi hindamiseks mao- ja rinnavähi korral kasutatakse FISH-meetodit.
KALA - uuringud võimaldavad määrata kromosoomide kvalitatiivseid ja kvantitatiivseid muutusi pahaloomuliste verehaiguste ja tahkete kasvajate diagnoosimiseks.
Tänapäeval kasutatakse FISH uuringuid laialdaselt kogu maailmas.
FISH-meetod (fluorestsents-in situ hübridisatsioon) on HER-2 / neu-geenide arvu uurimine vähirakkudes.
Näidustused:
- rinnavähk - ravi prognoosimiseks ja valimiseks;
- maovähk - ravi prognoosimiseks ja valimiseks.
Määrab raviarst.
Vajalik on histoloogiline protokoll ja immunohistokeemiline protokoll, IHC klaas.
Tulemuste tõlgendamine
FISH testi tulemused väljendatakse järgmiselt:
1. Positiivne (suurenenud sisaldus, toimub HER-2 geeni amplifikatsioon):
- HER-2 positiivne rinnavähk;
- HER-2 negatiivne rinnavähk.
Assuta kliinikus pakutakse. Fluorestsentsi hübridisatsioon, mida muidu nimetatakse FISH (FISH), on geneetiline test, mis annab aimu kasvaja olemusest. Uurides FISH-ga neoplasmi, saab arst teada, kas vähk on HER2 geeni suhtes positiivne või negatiivne. Keha rakkudes esineva geeni koopiad stimuleerivad ebatüüpiliste vähirakkude kasvu. Pärast diagnoosi möödumist saab arst koostada kõige üksikasjalikuma raviplaani.
Assuta kliiniku kaasaegne laborikompleks viib läbi FISH (FISH) analüüsi, et hinnata rinnavähi patoloogiaid:
- Ainulaadne testimine annab täpse pildi kasvaja olemusest, selle tunnustest.
- Erahaiglal on tulemuste saavutamiseks võimsad ressursid.
- Meil töötab Iisraeli parimad arstid, diagnostika ja teraapia viiakse läbi vastavalt individuaalsetele skeemidele.
Helistage, et teada saada, kuidas ravi taotleda. Taastage oma tervis Lähis-Ida suurimas haiglas.
Registreeruge konsultatsioonile
Kalaproov rinnavähi jaoks - onkoloogia arengu mehhanism
HER2 geeni retseptorid vastutavad HER2 valkude tootmise eest, mis on pahaloomulistes rakkudes leiduvad retseptorid. Kui retseptorid aktiveeritakse, saavad vähirakud signaali jagamise ja paljunemise vajaduse kohta. Tavaliselt reguleerivad HER 2 retseptorid rinnarakkude kasvu, säilitades kudedes tervisliku tasakaalu.
Siiski on tõestatud, et HER 2 geeni tootmine on viiest vähijuhtudest üleproduktsioon. See tähendab, et geeni ühe eksemplari asemel on inimesel geen igast vanemast. See seletab HER-retseptorite liigsust kehas, põhjustades kasvaja kontrollimatu ja agressiivse kasvu.
Selleks, et teada saada, kui palju on patoloogia arengu põhjus kehas seotud retseptorite ebanormaalse tootmisega, on vaja läbi viia kalanalüüs rinnavähi kohta. Peate teadma, kas vähi tüüp on HER2 positiivne või negatiivne. Seal on spetsiaalselt HER 2 retseptori positiivse rinnavähi jaoks välja töötatud ravimeetodeid. Analüüs võimaldab mitte raisata aega tõhusate mõjutamismeetodite otsimisele.
Kui kalareaktsioon viiakse läbi rinnavähi korral, kasutab arst kromosomaalsete kõrvalekallete visualiseerimiseks spetsiaalset värvimisvahendit. Uuritud kudedele rakendatud lahendus võimaldab näha kõrvalekaldeid. FISH-analüüsi eeliseks on see, et selle abil on võimalik tuvastada geneetilisi kõrvalekaldeid, mis on liiga väikesed, et neid alternatiivsete meetoditega mikroskoobi all uurida.
Testimise teine \u200b\u200beelis on see, et patsient saab tulemused kätele mõne päeva pärast, teised meetodid annavad joondamise alles mõne nädala pärast. Kalatesti kasutatakse lisaks rinna pahaloomulise kasvaja tuvastamisele põie vähkkasvaja patoloogia diagnoosimisel, leukeemia määramisel.
Analüüside liigid
HER2 positiivse või negatiivse olemuse väljaselgitamiseks saadavad Assuta kliiniku arstid patsiendi enda laborisse testima. Teste on kahte tüüpi:
- Immunohistokeemia - IHC tuvastab suures koguses valku. Katse ajal uurib patoloog koe mikroskoobi all spetsiaalsete värvimisvahendite abil. 1+ või 0 punkti saamiseks pole täiendavat testimist vaja. Skoori 2+ peetakse määramatuks ja see vajab täiendavat katsetamist. Tulemus 3+ kinnitab negatiivset stsenaariumi.
- MTF-test (hübridisatsioon) on järgmine samm vähktõve kahtluse korral. On oluline, et analüüsi viiks läbi kogenud patoloog, mis kõrvaldab vigu saadud tulemuste tõlgendamisel. On olemas kaks peamist tüüpi testi - kalauuringud rinnavähi ja erevälja meetodil. Positiivne kalatest on lõplik diagnostiline test.
Väga harva on kalade analüüs ebamäärane või mitmetähenduslik. Selle asjaolude kogumi korral on diagnoosi kinnitamiseks vajalik veel üks biopsia ja uus kalareaktsioon rinnavähi korral.
Kuidas on rinnavähi kalaproov - patsiendi juhend
HER 2 staatuse õigeks diagnoosimiseks viib arst läbi biopsia, mille käigus eemaldab patoloogiaga muudetud koeproovid. Enamikul juhtudel kasutatakse ebamugavustunde neutraliseerimiseks kohalikku anesteesiat. Tulevikus saadetakse ekstraheeritud kude uurimiseks laborisse, kus patoloog töötab sellega. On väga oluline, et labor oleks meditsiinilises keskkonnas autoriteetne, sest patsiendi elu sõltub otseselt õigest diagnoosist. Kalaproov rinnavähi jaoks on osutunud ohutuks protseduuriks. See ei nõua palju aega, eraldi protseduurid, välja arvatud biopsia ja täiendav kudede trauma.
Miks tehakse IHC testimist algselt? See on lihtsam ja soodsam. Kui analüüsid on ebaselged, on FISH-testimine siiski kohustuslik. Harvadel juhtudel on võimalik teine \u200b\u200bbiopsia koos proovide võtmisega. Kuid seda juhtub tõesti väga harva. Kui rinnavähi kalaproov on HER2-positiivne, määratakse teile tõhus HER2-positiivse vähiravi. Kuigi see on patoloogia agressiivne vorm, on selle diagnoosiga inimeste väljavaated viimastel aastatel märkimisväärselt paranenud. Selle põhjuseks on Iisraeli uued ja tõhusad rinnavähi ravimeetodid, mis on suunatud HER 2 retseptoritele.
Taotlege ravi
